摘要
目的：
本研究在前期已证实隔药灸脐治疗原发性痛经有效的基础上，通过进一步临床试验探讨神阙穴与相同神经节段非任脉穴位相比治疗原发性痛经是否具有特异性、药物在隔药灸脐治疗过程中的作用和地位。同时运用LC/MS联用的代谢组学技术检测患者治疗前后血浆和尿液代谢产物的变化，通过比较与对照组代谢产物和途径的差异，初步探明隔药灸脐特异性治疗原发性痛经的效应机制、药物在隔药灸脐治疗原发性痛经中发挥作用的生物学机制。
方法：
1.将90例原发性痛经患者随机分为隔药灸脐组、隔药灸大横组、艾条灸脐组各30例，采用视觉模拟评分法Visual Analogue Scale(VAS)评定痛经平均腹痛程度，通过COX痛经症状量表（the Cox Menstrual Symptom Scale）进行痛经临床症状评分，比较三组的疗效差异。
2.分别从隔药灸脐组、隔药灸大横组、艾条灸脐组中各随机选取10例患者，另选取正常受试者10例作为对照，运用LC/MS联用的代谢组学技术检测患者治疗前后以及正常受试者血浆和尿液的代谢产物，获得隔药灸脐治疗原发性痛经的相关代谢物质，推导其相关代谢通路，并通过比较与对照组代谢产物和途径的差异，建立临床症状、特征代谢产物和途径与神阙穴效应特异性的关系。
结果：
1.临床试验：一疗程后，三组均能显著降低VAS读数（P<0.01），隔药灸脐组和艾条灸脐组均能显著降低下腹部疼痛总频率（持续总时间）和严重程度评分（P<0.01）；三组下腹部疼痛总频率（持续总时间）、下腹部疼痛严重程度比较显示，隔药灸脐组、艾条灸脐组与隔药灸大横组均有极其显著性差异（P<0.01），隔药灸脐组与艾条灸脐组比较有极其显著性差异（P<0.01）。
2.代谢组学研究：三组治疗前后代谢产物均有明显改变。隔药灸脐治疗后雌酮、16-oxestrone、20a-dihydroprogesterone、15-酮-前列腺素F2α、methylimidazoleacetic acid、L-苯丙氨酸、L-酪氨酸、多巴胺-4-硫酸盐、γ-氨基丁酸的含量发生了变化；隔药灸大横组治疗后5-羟基-L-色氨酸、N-acetylvanilalanine、3,4-dihydroxyphenylacetaldehyde、L-酪氨酸、3,4–二羟基苯乙酸的含量发生了变化；艾条灸脐组治疗后脱氢表雄酮硫酸盐、15-keto-13,14-dihydroprostaglandin A2、5'-磷酸吡哆醛、多巴胺-4-硫酸盐、3,4-二羟基苯甲酸、高香草酸、3,4-dihydroxybenzylamine的含量发生了变化。
结论：
1.神阙穴对胞宫的效应具有特异性，其特异性体现为循经性和相对性；药物是影响神阙穴效应的因素之一。
2.对类固醇激素代谢相关的雌酮、16-oxestrone、20a-dihydroprogesterone、花生四烯酸代谢相关的15-酮-前列腺素F2α、免疫相关物质组胺、中枢神经递质γ-氨基丁酸的调节可能是神阙穴特异性调控胞宫的机理所在；隔药灸脐通过对生殖内分泌激素、局部致痛因子、免疫系统相关物质、神经递质的调节，影响机体神经、内分泌、免疫网络从而发挥对痛经的治疗作用，体现了神阙穴的特异性具有系统性的特点。
3.应用药物增强了灸脐对生殖内分泌激素中的孕激素、免疫相关物质组胺、中枢神经递质γ-氨基丁酸的调节，可能是药物在隔药灸脐治疗原发性痛经中的作用机制。
Objective:
Based on the previous studies of herbs-partitioned moxibustion on RN8for primarydysmenorrhea (PD), further studies were carried out. We focused on specificity of acupointeffect of RN8comparing with other non-RN acupoints in the same nerve segment fortreating primary dysmenorrhea, and we also focused on the functions of herbs during thetreatment. Differences of metabolites in plasma and urine of PD patients were compared byusing LC/MS metabonomics technology as to try to explore the specific effect mechanismof herbs-partitioned moxibustion on RN8treatment for PD and the biological mechanismof herbs during the treatment.
Methods:
a.90cases of PD patients were randomly divided into three groups (herbs-partitionedmoxibustion on RN8group, herbs-partitioned moxibustion on SP15group and moxa stickmoxibustion on RN8group), with30cases in each group. Visual Analogue Scale (VAS)and the Cox Menstrual Symptom Scale (CMSS) were used to evaluate the treatment effectof three groups.
b. Plasma and urine samples of30cases (10cases randomly chosen from each group)were tested by using LC/MS metabonomics technology, comparing with samples of10normal persons as control group. Related metabolites were obtained, and the metabolicpathways were deduced. Relationships among clinical symptoms, specific metabolites,metabolic pathways, and specific effect of acupoint RN8were built by comparing thedifferences of metabolites and metabolic pathways.
Results:
a. Clinical trials: After treatment, scores of VAS were reduced significantly in all threegroups (P<0.01), and scores of total frequency and average severity of lower abdominal pain in the CMSS were reduced significantly in both herbs-partitioned moxibustion on RN8group and moxa stick moxibustion on RN8group (P<0.01). Scores of herbs-partitionedmoxibustion on RN8group and moxa stick moxibustion on RN8group were significantlydifferent from herbs-partitioned moxibustion on SP15group in the CMSS (P<0.01).Scores of herbs-partitioned moxibustion on RN8group were significantly different frommoxa stick moxibustion on RN8group in the CMSS (P<0.01).
b. Metabonomics tests: After treatment, metabolites in all three groups variedsignificantly from base lines. Metabolites related to estrone,16-oxestrone,20a-Dihydroprogesterone,15-keto-prostaglandin F2α, methylimidazoleacetic acid,L-phenylalanine L-tyrosine, dopamine-4-sulfate and gamma-aminobutyric acid changed inherbs-partitioned moxibustion on RN8group. Metabolites related to5-hydroxy-L-tryptophan, N-acetylvanilalanine,3,4-dihydroxyphenylacetaldehyde,L-tyrosine and3,4-dihydroxybenzeneacetic acid changed in herbs-partitioned moxibustionon SP15group. Metabolites related to DHEA sulfate,15-keto-13,14-dihydroprostaglandinA2, pyridoxal5'-phosphate, dopamine-4-sulfate,3,4-dihydroxymandelic acid, homovanillicacid,3,4-dihydroxybenzylamine changed in moxa stick moxibustion on RN8group.
Conclusion:
a. It manifests that the meridian course specificity and relativity of acupoint RN8. Italso induces that the herbs are one of factors affecting the effect of RN8.
b. Estrone,16-oxestrone and20a-dihydroprogesterone associated with arachidonicacid metabolism,15-keto-prostaglandin F2αassociated with steroid hormone metabolism,histamine, and gamma-aminobutyric acid may be the mechanism of regulating the functionof the uterus specifically. Herbs-partitioned moxibustion on RN8group affects thenetwork of nervous system, endocrine system and immune system by regulating theendocrine hormones, local algogenic factors and substances associated with immunesystem. These mentioned above may be the biological mechanism of RN8for specificallyregulating the uterus function, and may also reflect the systematic specificity of RN8.
c. Herbs applied during the treatment can strengthen the change of progesterone,histamine, and gamma-aminobutyric acid. This may due to the mechanism effect of herbs.
引文
[1]高树中.脐通五脏六腑和十二经脉论[J].中医外治杂志，1994，3(1)：1-3.
[2]高树中.中医脐疗大全[M].济南:济南出版社，2009:3.
[3]贾红玲.中医脐疗的文献研究[D].济南：山东中医药大学，2010：9
[4]乐杰.妇产科学[M].北京:人民卫生出版社，2000：380.
[5] Mari R. Use of acupuncture in the treatment of primary dysmenorrheal. JugoslGinekol Opstet.1984，24(5-6):104-6.
[6] Proctor ML, Smith CA, Farquhar CM,et al. Transcutaneous electrical nervestimulation and acupuncture for primary dysmenorrhoea. Cochrane Database SystRev.2002;(1):CD002123.
[7]梁繁荣，唐勇，曾芳.经穴效应特异性国内外研究现状与展望[J].上海针灸杂志，2008，27(12)：43-45.
[8]杜冬青，尹翠菊，马玉侠等.隔药灸脐法治疗原发性痛经临床研究[J].上海针灸杂志，2011，8(30)：514-516.
[9]李忠仁.实验针灸学[M].1.北京:中国中医药出版社，2003：115.
[10] Nicholson JK, Lindon JC, Holmes E．’Metabonomics’: understandjng the metabolicresponses of living systems to pathophysiological stimuli via multivariate statisticalanalysis of biological NMR spectroscopic data. Xenobiotica.1999,29(11):1181-1189.
[11] Nicholson JK，Wilson ID. Opinion: understanding global systems biology: metabo-nomics and the continuum of metabolism. Nat Rev Drug Discov.2003,2(8):668-676.
[12]中华人民共和国卫生部．中药新药临床研究指导原则：第一辑[M]．1993：263-265.
[13] Cox DJ, Meyer RG. Behavioral treatment parameters with primary dysmenorrheal[J].J Behav Med.1978,1(3):297-310.
[14] Jensen MP, Karoly P, Braver S. The measurement of clinic pain intensity: acomparison of six methods[J]. Pain,1986,27:117-126.
[15]李凌鑫，孟智宏，樊小农等.经穴效应特异性研究进展[J].中国针灸，2011，31(11)：1053-1056.
[16]解秸萍.电针治疗咳喘的穴位特异性观察[J].中国针灸，1996，(2)：28-30
[17]林华，易受乡，林亚平.针刺改善冠心病心脏功能的临床观察[J].甘肃中医，2002，15(4)：86-89.
[18]岑钰，陈跃来，哈力甫等.会阳穴治疗不稳定膀胱的特异性研究[J].上海中医药杂志，2007，41(2)：38-40.
[19] Yu-Xia Ma, Liang-Xiao Ma, Xue-lian Liu et al. A Comparative Study on the Imme-diate Effects of Electroacupuncture at Sanyinjiao (SP6), Xuanzhong (GB39) and aNon-Meridian Point on Menstrual Pain and Uterine Arterial Blood Flow in PrimaryDysmenorrhea Patients. Pain Medicine,2010,11(10):1564-1575.
[20]任玉兰，赵凌，刘迈兰等.基于数据挖掘探析古代针灸治疗功能性消化不良的选穴特点[J].辽宁中医药杂志，2009，36(2)：259-262.
[21]赵凌，任玉兰，梁繁荣.基于数据挖掘技术分析历代针灸治疗偏头痛的用穴特点[J].中国针灸，2009，29(6)：467-472.
[22]王德军，常小荣，严洁等.针刺足阳明胃经特定穴与非特定穴治疗功能性消化不良疗效比较[J].中国针灸，2012，32(8)：703-706.
[23]李学智，刘旭光，宋文忠等.针刺少阳经穴对慢性偏头痛患者脑内葡萄糖代谢的影响[J].中国针灸，2008，28(11)：854-859.
[24]赵凌，游自立，唐勇等.运用功能磁共振成像观察大脑中的针刺效应[J].时珍国医国药,2009,20(6):1343-1345.
[25]刘娟，吴巧凤，孙博等.利用气质联用方法研究功能性消化不良患者血浆代谢谱的变化[J].军事医学,2011,35(6):454-458.
[26]梁繁荣.经穴效应特异性初步研究[C].中国针灸学会2009学术年会论文集，中国针灸学会，2009：236-239.
[27] Linde K, Streng A, Jurgens S, et al. Acupuncture for patients with migraine: arandomized controlled trial[J]. JAMA2005，293(17):2118-2125.
[28] Melchart D, Streng A, Hoppe A, et a1. Acupuncture in patients with tension-typeheadache:randomized controlled tria[J]. BMJ,2005，331:376-382.
[29] Vhitt C, Brinkhaus B, Jena S, et al. Acupuncture in patients with osteoarthritis of theknee: a randomized trial [J]. Lancet2005，366(9480):136-143.
[30]高树中.针灸治疗学[M].1.上海：上海科学技术出版社,2009:92.
[31] Devaux PG, Horning MG, Horning EC. Benyzl-oxime derivative of steroids: a newmetabolic profile procedure for human urinary steroids [J]. Anal Lett,1971,4:151
[32] Elsevier. J Chromatogr. A.1986,379.
[33]王金海，杜小正，方晓丽等.代谢组学技术在针灸研究中的应用探讨[J].甘肃中医学院学，2012，(1)：18-20.
[34]吴巧凤，徐世珍，余曙光等.基于1HNMR代谢组学的阳明经穴特异性研究时珍[J].国医国药，2010，21(10)：2674-2676.
[35]吴巧凤，毛森，蔡玮等.针刺俞-募穴对功能性消化不良大鼠血清大分子代谢产物的影响[J].针刺研究，2010，35(4)：287-292.
[36]沈雪勇.经络腧穴学[M].北京：中国中医药出版社，2003：226.
[37]沈雪勇.经络腧穴学[M].北京：中国中医药出版社，2003：92
[38]丁喜艳，佘延芬，马良宵等.经穴效应特异性的3个基本特征[J].中华中医药杂志，2010，25（9）：1356-1359.
[39]张惜阴.实用妇产科学[M].人民卫生出版社，2004.
[40]韩蓁，张明慧.原发性痛经病因研究进展.国外医学·妇幼保健分册：1997，8(1)：1-2.
[41]党海珍，滕久祥，彭芝配等.原发性痛经疼痛的中西医研究概况.湖南中医学院学报，2000，20(3)：70-71.
[42]吕艳青，栗原博.组胺在机体免疫反应中的作用[J].中国药理学通报，2007，23(1)：13-16.
[43]王瑞霞，俞超芹.原发性痛经患者外周血T淋巴细胞亚群的研究[J].实用妇产科学杂志，2004，20(4)：229-230.
[44]蒋丽欢.多巴胺受体激动剂的药理研究进展.中国实用医药[J].2011，6(2)：232-234.
[45] Julianna K. Recent advances in GABA research[J]. Neurochen International，1999，34(5)：353-358
[46]万选才，杨天祝，徐承焘.现代神经生物学[M].北京医科大学中国协和医科人学联合出版社，1999：158-162
[47]杨藻宸.药理学和药物治疗学(上册)[M].北京：人民卫生出版社，2000，487-530
[48]方廉，罗荣生. GABA对离体卵巢颗粒细胞孕酮的影响[J].细胞生物学杂志，1994,16(3)：137-139
[49] Small GW. The pathogenesis of Alzheimer's disease[J]. J Clin Psychiatry,1998;59(Suppl9):7-14.
[50]刘丽敏，李群.痛经气滞血瘀证与NGF及致痛物质5-HT的关系[J].山东中医药大学学报，2011，35(3)：231-232
[1]禹龙香.某大学女生月经情况和常见妇科病的问卷调查分析[J].华南预防医学，2006，32(1)：79-80
[2] Jamieson SJ, Steege FJ. The prevalence of dysmenorrheal, dyspareunia, pelvic pain,and irritable bowe1syndrome in primary car practices[J]. Obstet Gyneoo1,1996,1:55-59.
[3] Harlow S, Park M. A longitudinal severity of risk factors for the occurrence，duration and severity of menstrual cramps in a cohort of college women[J]. Br JObstet Gyneeol.1996,103:1134-1142.
[4] Yusoff M, Dawood MD. Primary Dysmenorrhea: Advances in Pathogenesis andManagement[J]. Obstetrics&Gynecology,2006,108:428-441.
[5] Dawood MY. Nonsteroidal anti-inflammatory drugs and changing attitudes towarddysmenorrhea[J]. Am J Med,1988,84:239.
[6]潘米香,刘世新,吴艳.应用前列腺素抑制剂治疗痛经80例临床分析[Ｊ].数理医药学杂志,2000,13(6):81.
[7]敖桂珍，张玉彬，张奕华.新型非甾体抗炎药作用靶环氧酶-2研究进展［J］.中国新药杂志，2001，(10)：492-496.
[8] Helms JM. Acupuncture for the management of primary dysmenorrheal. ObstetGynecol.1987,69(1):51-56
[9]史晓林，杨爱民，李凤芝.针刺三阴交治疗原发性痛经120例疗效分析[J].中国针灸，1994，(5)：17-18.
[10]刘爱珍，张春美.针刺与心理治疗痛经的对比研究[J].中国针灸，1999，(4)：209-210.
[11]郭之平，吕霞霞，赵惠琴.针刺防治原发性痛经39例[J].陕西中医，2003，24(12)：1120-1121.
[12]张淼，孙申田.俞募通经法治疗原发性32例临床观察[J].中国中医药科技，2003，10(10)：322.
[13]周丽莎.针刺次髎穴治疗原发性痛经的临床观察[J].湖北中医杂志,2003,25(8):47.
[14]黄晓桃，张明敏，黄光英.针刺治疗原发性痛经的临床研究[J].中华物理医学与康复杂志,2004,26(7):432-433.
[15]王传年.针刺治疗痛经40例疗效观察[J].四川中医，2005，23(2)：84-85.
[16]汪文清.针刺治疗原发性痛经临床观察[J].湖北中医杂志,2007,29(6):57.
[17]职良喜.浮针疗法治疗原发性痛经的随机对照观察[J].中国针灸，2007，27(1)：18-21.
[18]滕春光，孙靖若.腹针配合体针治疗原发性痛经临床疗效观察[J].中医临床研究，2010，2(8)：74-75，80.
[19]付蕾.针刺治疗原发性痛经50例[J].针灸临床杂志，2010，26(7)：16-17
[20]侯文静，丛茜，宋秀敏等.选穴针刺治疗原发性痛经31例临床疗效观察[J].山东医药，2010，50(35)：57-58
[21]秘媛媛.针刺董氏门金穴治疗原发性痛经40例疗效观察[J].山西中医学院学报，2010，11(1)：38-39
[22]陶蓉.针灸治疗原发性痛经86例[J].按摩与康复医学，2010，(26)：10-12
[23]申怡.针灸治疗原发性痛经临床观察[J].长治医学院学报，2011，25(3)：219-221
[24]唐淑兰.中极穴围刺法治疗原发性痛经32例疗效观察[J].河北中医，2011，33(8)：1198-1200
[25]刘希茹，张蕴佳，王波等.以地机为主穴针刺治疗原发性痛经30例[J].上海中医药杂志，2011，45(9)：58-59
[26]蒋鸿云.针刺治疗原发性痛经40例疗效观察[J].甘肃中医学院学报，2011，28(03)：56-57
[27]赵志兰.针刺治疗原发性痛经疗效观察[J].黑龙江中医药：2011：(3)：46-47
[28] CHEN Miao-ling, JU Yan-li. Instant effect of acupuncture at Suliao mainlyfor primarydysmenorrheal[J]. World Journal of Acupuncture-Moxibustion,2011,21(2):26-30
[29]曹银香.温针灸治疗原发性痛经65例临床观察[J].针灸推拿，2011，43(7)：68
[30]张连媚.单纯针刺治疗原发性痛经45例[J].福建中医药，2012，43(2)：25-26
[31]孙立虹,葛建军,杨继军等.隔物灸治疗原发性痛经42例疗效观察[J].河北中医药学报，2004，19(3)：37.
[32]王松梅，李兴国，张立群等.隔药灸治疗原发性痛经临床观察[J].中国针灸，2005，25(11)：773-775.
[33]孙立虹，葛建军，杨继军等.隔物灸治疗寒湿凝滞型原发性痛经的随机对照临床研究[J].针刺研究，2009，34(6)：398-402.
[34]饶赟.热敏点灸疗治疗原发性痛经30例[J].江西中医药，2009，40(324)：69.
[35]张欣，尚坤.隔姜灸治疗原发性痛经（寒湿凝滞型）36例临床观察[J].辽宁中医杂志，2010，37(9)：1795-1796.
[36]朱英，陈日兰，姬乐.隔药灸神阙治疗原发性痛经疗效观察[J].中国针灸，2010，30(6)：453-455.
[37]张乐伟，尚学东，李擎.艾灸治疗优秀乒乓球运动员痛经疗效观察[J].中国运动医学杂志，2011，30(9)：845-848
[38]朱英，姬乐，苗芙蕊.隔药灸神阙穴对原发性痛经患者经期血液流变学的影响[J].辽宁中医杂志，2011，38(3)：548-550
[39] LIU Cheng, ZHANG Hai-yan.Therapeutic effect of moxibustion on primarydysmenorrhea due to damp-cold retention[J].World Journal of Acupuncture-Moxibustion,2011,21(3):1-4
[40]李蔚江，王安迪，曹晓雯.艾灸地机穴治疗原发性痛经的腹部红外热像特征研究[J].上海针灸杂志，2012，31(9)：659-661
[41]李晔.温针治疗原发性痛经130例[J].上海针灸杂志，1998，17(3)：16-17.
[42]柳春胜,邢伟.针灸治疗原发性痛经245例疗效分析[J].针灸临床杂志，2000，16(4)：8-9.
[43]熊秀蓉，严炜，姚志芳.针灸治疗原发性痛经68例临床观察[J]福建中医学院学报，2001，11(3)：33-34.
[44]郗玉芳.温针灸法治疗痛经72例[J].上海针灸杂志，2003，22(2)：26.
[45]胡萍，陈尚杰.温针灸治疗原发性痛经的临床观察[J].实用中西医结合临床，2005，5(6)：21-22.
[46]郑兆俭.针灸治疗原发性痛经疗效观察[J].浙江中西医结合杂志[J]，2006，16(2)：78-79,81.
[47]吴艳荣，乔敏，高希言.温针灸治疗原发性寒凝血瘀型痛经的临床观察[J].国际中医中药杂志，2008，30(5)：363.
[48]薛海峰.温针灸治疗寒凝血瘀型原发性痛经30例临床观察[J].中国中医药科技，2009，16(5)：377.
[49]曹春梅，刘春梅,黄丽华等.腹针结合艾灸治疗原发性痛经的临床观察[J].中国医药导报，2010，7(22)：128-129.
[50]付蓓，李云君.针灸治疗原发性痛经临床观察[J].湖北中医杂志，2010，32(3)：73-74.
[51]任莉赟，马向明.针刺配合隔姜灸治疗原发性痛经疗效观察[J].上海针灸杂志，2010，29(8)：517-518.
[52]王云松.温针灸治疗痛经36例[J].上海针灸杂志，2011，30(7)：443.
[53]杨春花.温针灸配合隔物灸治疗原发性痛经28例[J].中国中医药科技，2012，19(3)：284-285.
[54]戴明.温针灸治疗寒湿凝滞型原发性痛经疗效观察[J].上海针灸杂志，2012，31(6)：385-386.
[55]张原本.针灸治疗痛经35例临床分析[J].中国中医药指南，2012，10(18)：273-275