猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒M蛋白/N蛋白间与N蛋白/3'UTR引入重复序列的反向遗传操作

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	作者：郑海红 ; 孙竹筠 ; 丛雁方 ; 张可煜 ; 高飞 ; 童光志 关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(Porcine ; reproductive ; and ; respiratory ; syndrome ; virus ; PRRSV) ; M蛋白/N蛋白 ; N蛋白/3'UTR ; 反向遗传操作 中文刊名：湖北畜牧兽医 英文刊名：Hubei Journal of Animal and Veterinary Sciences 机构：中国农业科学院上海兽医研究所; 出版日期：2019-03-15 出版单位：湖北畜牧兽医 年：2019 期：03 基金：国家自然科学基金面上项目(31670158) 语种：中文; 页：12-15 页数：4 CN：42-1349/S ISSN：1007-273X 分类号：S852.651

摘要

为获得一种经全长cDNA突变体拯救出的、随着传代次数的增多而最终致死的突变病毒,以嵌合感染性克隆p7AX12为骨架,分别在猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)M蛋白与N蛋白间或(和)N蛋白/3'UTR之间插入32 nt,依次构建4个嵌合突变体pBJ327、pBJ732、pBJD32和pBJD32R,经DNA转染Marc-145细胞后4个嵌合突变体均能拯救出病毒,且拯救病毒中的突变或插入的碱基具有遗传稳定性。突变病毒传代5次,没有最终致死的原因还有待于进一步研究分析。获得的4个突变病毒也为研制PRRSV基因标识疫苗及PRRSV复制转录机制研究奠定了基础。
        

引文

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